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技術(shù)文章

 無菌室的建造規(guī)程

2021-02-10 11:03:19

  1. 無菌室應(yīng)設(shè)有無菌操作間和緩沖間,無菌操作間潔凈度應(yīng)達(dá)到10000級,室內(nèi)溫度保持在20-24℃,濕度保持在45-60%。超凈臺潔凈度應(yīng)達(dá)到100級。

  2. 無菌室應(yīng)保持清潔,嚴(yán)禁堆放雜物,以防污染。

  3. 嚴(yán)防一切滅菌器材和培養(yǎng)基污染,已污染者應(yīng)停止使用。

  4. 無菌室應(yīng)備有工作濃度的消毒液,如5%的甲酚溶液,70%的酒精,0.1%的新潔爾滅溶液,等等。

  5. 無菌室應(yīng)定期用適宜的消毒液滅菌清潔,以保證無菌室的潔凈度符合要求。

  6. 需要帶入無菌室使用的儀器,器械,平皿等一切物品,均應(yīng)包扎嚴(yán)密,并應(yīng)經(jīng)過適宜的方法滅菌。

  7. 工作人員進(jìn)入無菌室前,必須用肥皂或消毒液洗手消毒,然后在緩沖間更換專用工作服,鞋,帽子,口罩和手套(或用70%的乙醇再次擦拭雙手),方可進(jìn)入無菌室進(jìn)行操作。

  8. 無菌室使用前必須打開無菌室的紫外燈輻照滅菌30分鐘以上,并且同時(shí)打開超凈臺進(jìn)行吹風(fēng)。操作完畢,應(yīng)及時(shí)清理無菌室,再用紫外燈輻照滅菌20分鐘。

  9. 供試品在檢查前,應(yīng)保持外包裝完整,不得開啟,以防污染。檢查前,用70%的酒精棉球消毒外表面。

  10. 每次操作過程中,均應(yīng)做陰性對照,以檢查無菌操作的可靠性。

  11. 吸取菌液時(shí),必須用吸耳球吸取,切勿直接用口接觸吸管。

  12. 接種針每次使用前后,必須通過火焰灼燒滅菌,待冷卻后,方可接種培養(yǎng)物。

  13. 帶有菌液的吸管,試管,培養(yǎng)皿等器皿應(yīng)浸泡在盛有5%來蘇爾溶液的消毒桶內(nèi)消毒,24小時(shí)后取出沖洗。

  14. 如有菌液灑在桌上或地上,應(yīng)立即用5%石碳酸溶液或3%的來蘇爾傾覆在被污染處至少30分鐘,再做處理。工作衣帽等受到菌液污染時(shí),應(yīng)立即脫去,高壓蒸汽滅菌后洗滌。

  15. 凡帶有活菌的物品,必須經(jīng)消毒后,才能在水龍頭下沖洗,嚴(yán)禁污染下水道。

  16. 無菌室應(yīng)每月檢查菌落數(shù)。在超凈工作臺開啟的狀態(tài)下,取內(nèi)徑90mm的無菌培養(yǎng)皿若干,無菌操作分別注入融化并冷卻至約45℃的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基約15ml,放至凝固后,倒置于30~35℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)48小時(shí),證明無菌后,取平板3~5個(gè),分別放置工作位置的左中右等處,開蓋暴露30分鐘后,倒置于30~35℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)48小時(shí),取出檢查。100級潔凈區(qū)平板雜菌數(shù)平均不得超過1個(gè)菌落,10000級潔凈室平均不得超過3個(gè)菌落。如超過限度,應(yīng)對無菌室進(jìn)行徹底消毒,直至重復(fù)檢查合乎要求為止。

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